種苗快繁
- 分類:技術創新
- 發布時間:2021-12-22 11:17:25
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藍莓組培快繁關鍵技術
1 材料與方法
1.1 實驗材料
該試驗以藍莓盛世半木質化莖段為外植體,采自遼寧省農科院大連分院試驗基地。
1.2 實驗方法
無菌株系的建立:晴天上午取溫室內生長健壯、腋芽飽滿的一年生枝條,去掉葉片,剪成1.0~1.5厘米長的單芽莖段,用飽和洗衣粉澄清液浸l0分鐘后,再用自來水沖洗30分鐘,在超凈工作臺上用75%酒精浸30秒,無菌水洗1次,再用0.1%升汞滅菌6~10分鐘后,用無菌水沖洗3次,再放入帶3層濾紙的培養皿中,待莖段上的水被濾紙吸附后,將單芽莖段接種在誘導培養基上。
誘導培養基篩選:不定芽誘導以WPM為基本培養基,附加不同濃度的玉米素ZT(0.3,0.5,0.8,1.0,1.5)毫克/升,添加一定濃度的赤霉素GA30.5毫克/升與生長素IAA0.3毫克/升添加蔗糖30克/升,瓊脂4.6克/升,將培養基pH值調至5.4每天光照12小時,光照強度1500~3000勒克斯,培養溫度25℃。誘導試驗每個處理只接種了10個單芽,3次重復,20天調查其污染率與誘導率。
增 殖 培 養 : 增 殖 培 養 以WPM為基本培養基,附加不同濃度的玉米素ZT(0.3,0.5,0.8,1.0,1.5)毫克/升,添加一定濃度生長素IAA0.3毫克/升,糖30克,瓊脂4.6克調pH值至5.4,待誘導出來的不定芽長高至2~3厘米時,接種到設定的培養基上,每處理接種3瓶,每瓶5個1.0~1.5厘米單芽莖段,3次重復,60天調查增殖倍數及生長勢。煉苗:選生長健壯的試管苗進行移栽,將試管苗在大棚內逐漸打開瓶口,經常轉動瓶身,使之適應外界條件,一般需3~5天。
應用DPS軟件對試驗數據進行方差分析。
表1 ZT濃度對藍莓盛世外植體誘導率的影響
表2 ZT濃度對盛世試管苗增殖與生長的影響
2 結果與分析
2.1 不同ZT濃度對盛世外
植體誘導率的影響
由表1可以看出,盛世的污染率都不高,這與在溫室內取外植體有一定的關系,枝條上的雜菌相對露地上要少很多。誘導率隨著ZT濃度的增加而升高,當ZT濃度增加到1.0毫克/升時,誘導率達86.67%,當ZT濃度增加到1.5毫克/升時的誘導率下降為83.33%。由此可以看出隨著ZT濃度的增加外植體誘導率逐漸升高,當ZT濃度達到一定高度時,誘導率達到最高,再增加ZT濃度,誘導率反而下降。
2.2 不同ZT濃度盛世的增值倍數的影響
由表2可見,盛世增殖培養ZT濃度在0.3毫克/升時,試管苗生長較慢,隨著ZT濃度增加,試管苗株高、生長表現均有所提高,當ZT濃度增加到0.8毫克/升時,試管苗株高4.47厘米,試管苗生長健壯形態正常,增殖倍數達6.4倍,有效苗比例高,生長表現均好于其他處理,隨著ZT濃度的增加基部大量萌發叢生芽,增殖倍數變大,苗變細變弱,玻璃化苗增加將來可用于移栽的有效苗減少,不利于優質種苗的生產。
隨著ZT濃度增加,當ZT濃度達到0.8毫克/升時,盛世試管苗增殖率最高,達6.4倍,較其他處理差異顯著。
2.3 移栽
移栽前用煙熏劑(異丙威、腐霉利、百菌清等)熏棚。做寬1.0~1.2米的苗床,長按棚寬而定,苗床土要進行消毒,移栽基質為水苔,水苔浸泡1~2天后,鋪在消毒好的苗床上,厚度5厘米左右,澆透水后再用多菌靈對水苔進行殺菌。取出培養瓶內的植株,剪成2~3厘米長枝段,用1000倍液的海藻素浸泡5分鐘,扦插在經過消毒處理好的水苔上。枝1.5~2.0厘米,栽完澆水,做成小拱棚,上覆無紡布,大棚上外遮陽。溫度控制在25℃左右,相對濕度80%以上,一周后逐漸打開小拱棚,20天后植株開始生根,頂尖長出新葉。
3 小結
試 驗 結 果 表 明 , 藍 莓 盛世 品 種 的 最 佳 誘 導 培 養 基 為WPM+ZT1.0毫克/升+GA 3 0.5毫克/升+IAA0.3毫克/升+糖30克+瓊脂4.6克,誘導率高達86.67%;最佳增殖培養基為WPM+ZT0.8毫克/升+IBA0.1毫克/升+糖30克+瓊脂4.6克,增殖倍數為6.4倍。藍莓盛世誘導與增殖培養過程中,通過提高玉米素ZT的濃度,可有效地提高誘導率和繁殖倍數。外植體誘導試驗中過高的ZT濃度會抑制腋芽的萌發,而在增殖試驗中過高的ZT濃度會使試管苗的叢生芽數量增加過大,苗變弱,玻璃化傾向增加,質量急劇下降。